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实验五 酵母菌的个体形态观察
一、目的要求
1.观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。
2.学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。
二、基本原理
酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色，由于细胞中新陈代谢的作用。使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞。
三、器材
酵母菌、0.1%吕氏碱性美蓝染液，显微镜，载玻片，盖玻片等。
四、操作步骤
1．在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液，液滴不可过多或过少，以免盖上盖玻片时，溢出或留有气泡。然后按无菌操作法取在琼脂斜面上培养48小时的酵母菌少许，放在吕氏碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。
2．用镊子夹盖玻片一块，小心地盖在液滴上。盖盖玻片时应注意，不能将盖玻片平放下去，应先将盖玻片的一边与液滴接触，然后将整个盖玻片慢慢放下，这样可以避免产生气泡。
3．将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察，然后换用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。
4．染色半小时后，再观察一下死细胞数是否增加。
5．用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述的操作。
五、实验报告
1.绘图说明你所观察到的酵母菌的细胞结构及出芽生殖方式。
2.酵母菌在实际应用中有什么作用？
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