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高中生物新教材中各种试剂的配制

点击数:    更新时间:2008-5-10 20:49:51    
    

 

各种试剂的配制

紫阮

高中生物新教材中有很多是新开的实验,其中有很多药品和试剂的配制教材没有详细说明,实验员在准备实验时往往无从下手,本文具体说明了实验中各种试剂的配制,与同行共享.

名称

   

用途

作用原理

颜色变化

斐林试剂

甲液:质量分数为0.1g/ml的氢氧化钠溶液.

乙液:质量分数为0.05g/ml的硫酸铜溶液.

   使用时,将4~5滴乙液滴入2ml甲液中,混合后立即使用

检测还原糖

 

斐林试剂与可溶性的还原糖(葡萄糖.果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化铜沉淀(CH2OH-(CHOH)4-CHO + 2Cu(OH)2 CH2OH-(CHOH)4-COOH + Cu2O + 2H2O)     

加热后呈砖红色沉淀.

苏丹

苏丹Ⅲ 0.01g,加90%乙醇5ml溶解后,加甘油5ml,摇匀,即得.本液应置棕色玻璃瓶内保存,在2个月内应用.

检测脂肪

苏丹Ⅲ是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%),从而使脂肪呈现橘黄色.

橘黄色或红色

双缩脲试剂

双缩脲试剂A:质量分数为0.1g/ml的氢氧化钠溶液.

双缩脲试剂B:质量分数为0.01的硫酸铜溶液.

  使用时,先向试管中加入2mlA,再向试管中加入34滴B.

 

检测蛋白质

 

在碱性溶液中,双缩脲(2NOC-NH-CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,蛋白质分子中有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应. 

 

无色-浅蓝色-紫色

碘液

取6克碘化钾溶于20ml蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解后,再加入80ml蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶中.

检测淀粉

 

   碘液在中性或酸性环境上,碘分子容易与淀粉形成蓝色络合物.

 

 

甲基绿

吡罗红0.25g ,甲基绿0.15g ,95%乙醇20ml,甘油20ml.将以上试剂混合溶解后用0.5%苯酚水溶液稀释至100ml.

检测DNA

核酸均为酸性,对碱性染料甲基绿和吡罗红具有亲和力.用这两种染料混合处理细胞时,由于DNA和RNA聚合程度不同,甲基绿分子有两个相对的正电荷,与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力,可使DNA分子染成蓝绿色,而吡罗红分子中仅一个正电荷,尔蒙可与低聚分子RNA结合使其染成红色.

绿色

吡罗红

检测RNA

红色

健那绿B

.g健那绿溶解于50ml生理盐水,加温到30~40℃,让其充分溶解即得.

检测线粒体

健那绿B(Jnaus greenB)可专一性地对线粒体进行超活染色,这是由于线粒体内的细胞色素氧化系的作用,使健那绿B染粒始终保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中的健那绿B被还原成无色的化合物.

蓝绿色

溴麝香草酚蓝水溶液

取0.1g溴代麝香草酚蓝溶解在100ml蒸馏水中,滴入0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色.

 

检测CO

溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝). 待测物若有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色

由蓝变绿再变黄

重铬酸钾溶液

取重铬酸钾7.5克,加水使溶解成100ml 即得

检测酒精

 

酒精在重铬酸钾等氧化剂的作用下,能迅速氧化生成乙醛(CHCHO),并进一步气化生成乙酸(冰醋酸CHCOOH)

 

灰绿色

龙胆紫

1g龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水稀释到100ml,保存在棕色瓶内.

 

 

 

 

 

 

 

 

染色体容易被碱性或酸性染液着色.龙胆紫是一种混合的碱性染料(主要是结晶紫和甲基紫的混合物),醋酸洋红染色液和改良苯酚品红是酸性染料(醋酸洋红染料在被醋酸固定的同时,洋红将核或染色体染成红色),因此三者都可以作为检测染色体的物质.

 

深蓝色

醋酸洋红染色

:将洋红粉末1g倒入100ml45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(煮沸时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用.也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5~10,至溶液变为暗红色而不发生沉淀为止.如制作永久标本染色液时,可加入饱和氢氧化铁醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色呈浅蓝色为止.

 

红色

改良苯酚品红

20ml苯酚品红染液(45ml母液,6ml冰醋酸,6ml 37%甲醛混合均匀)加入180ml 45%乙酸和3.6g山梨醇,静置两周后使用.

 

红色

 

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